除了患有严重的高血糖症的妇女之外，妊娠糖尿病的诊断是根据口服葡萄糖耐受度的测试而得之。
接受筛检的孕妇在妊娠24~28周时，做50克葡萄糖的筛检测试：不管孕妇前一餐什么时候进食，均需将50克的葡萄糖溶于300cc的水中，于3~5分钟内喝完，一小时后若血糖检验值超过140mgdl，则需进一步安排100克葡萄糖的耐糖测试。
接受口服葡萄糖耐受测试者，至少经过了3天不受限制的饮食(天天要摄取多于150g碳水化合物)与生理活动没有受到限制的情形下，在测试中不许抽烟，并于前一晚禁食的情形下，在翌日早上抽血后，喝下100克葡萄糖泡水400cc，并于一、二、三小时后再各抽一次血检查血糖值，
透过上述程序，便可获得4项检验值。四次血糖值中若有二项或二项以上超过标准，则可诊断为妊娠糖尿病。
